植物病理学中塑封标本制作的一般步骤

　　摘要：完善而充足的植物病害标本是植物病理学实验教学的重要保证,标本的多样性能够体现不同的标本制作技术,使学生全方位地了解标本的症状特征,提高学生学习专业课的兴趣。随着信息技术的发展,添加二维码的塑封标本增加了标本的多样性,对其具体的制作方法及在植物病理学实验课中的应用进行探讨,以期从本科实验角度出发,提高实验的教学效果。

　　关键词：植物病害; 塑封标本; 制作; 应用;

　　Manufacturing and application of plant disease specimens with covered plastic seals

　　YANG Guang-ling DONG Hui KONG Ling-guang LIU Ling-zhi

　　College of Plant Protection, Shandong Agricultural University

　　Abstract：Complete and adequate specimen specimens of plant diseases are an important guarantee for experimental teaching of plant pathology. The diversity of specimens can reflect different specimen production techniques, so that students can fully understand the symptom characteristics of specimens and improve students' interest in learning professional courses. With the development of information technology, the plastic seal specimens with adding two-dimensional code has increased the diversity of specimens. In order to improve the teaching effect of the experiment from the perspective of undergraduate experiments, this article discusses the specific production method and its application in the experimental course of plant pathology.

　　植物病害标本是高等农业院校“植物病理学实验”的主体教具,能够展现典型的植物病害症状,并且通过制作临时玻片,在显微镜下看到典型病原物的形态特征,具有不受植物生长季节和区域限制的特点,在植物病理学实验教学和科研中有着至关重要的作用。植物病害标本的种类多种多样,如根据取样和制作方法的不同,可以分为浸渍标本、腊叶标本、玻片标本、盒装标本等,但同一植物病害的相同部位可以采用多种制作技术,制成不同种类的标本,使得标本的保存更加多样化[1]。腊叶标本的长期保存形式主要有盒装标本和塑封标本,其中塑封标本更能保持材料的原色和发病症状,提高病害标本的展示效果,现将其具体的制作方法与在植物病理学实验的应用探讨如下。

　　1 塑封标本的适用范围

　　植物塑封标本的制作有一定的局限性,大多数草本植物的茎、少数木本植物木质化的树枝、含水量少,厚薄适中的叶片、穗等等。根据塑封机型号的要求,所有制作成塑封标本的材料厚度不能超过1.5mm[2]。

　　2 塑封标本的优点

　　大多数的植物病害腊叶标本都能制作成为盒装标本,塑封标本相对于盒装标本的制作存在一定的限制,但也有其优点:(1)塑封标本重量轻、易搬运、占用空间小;(2)制作简单,可根据教学需要随时制作,是制作标本展台最佳选择;(3)耐保存、经久耐用,防虫蛀、防潮湿、防霉变;(4)可以正反面都能看,病害典型症状一目了然;(5)制作成本低,不易损坏;(6)不用经常熏蒸,减少污染。

　　3 制作塑封标本的一般步骤

　　植物病害塑封标本的制作与其它如盒装标本、浸渍标本有着相同的制作步骤,一般分为采集-筛选-压制-制作-保存几个步骤,具体内容如下。

　　3.1 植物病害的采集

　　3.1.1 植物病害采集工具

　　环境条件与植物病害的发生有着密切的关系,不同季节及环境条件下,病害的发生有所不同,大多数的病害发生在根、茎、叶、果实上,针对不同的部位,植物病害标本的采集要有合适的采集用具,如枝干类病害标本采集需要用手锯、刮皮刀、果枝剪或高枝剪等;叶片、果实病害采集需要普通剪刀剪取即可等等。另外,还需要放大镜、标本夹、标本纸(吸水纸或草纸)、采集标签、记号笔、纸袋和记录本等。

　　3.1.2 采集方法及记录

　　植物病害标本是一种有形的实物标本,能够形象地、直观地展示植物病害症状的特点和病原物的形态特征[3],大部分植物病害标本都能从田间、果园、蔬菜大棚等采集得到。病害的发生有一定的规律,要充分掌握病害发生的季节规律及寄主的生长规律才能收获症状特征比较典型的标本。根据季节不同,采到的病害标本不同,如在北方每年的5～6月份能够采到小麦病害,如小麦锈病、白粉病、全蚀病、赤霉病等,9～11月份是各种作物处在收获期植物病害具有典型症状采集的最好季节,果树、大田作物、经济作物、蔬菜等病害标本都能采到,如苹果褐斑病、腐烂病;玉米大斑病、小斑病、褐斑病;花生黑斑病;高粱炭疽病等等。在采集标本的过程中,为了区分采集的不同标本,应注意及时记录,填写好采集记录标签,如寄主名称、时间地点、采集人姓名及病害发生状况和主要的生态环境因子,等等,若条件允许,也可以使用数码相机将具有典型症状的病害标本进行拍照记录,效果更好[4]。

　　3.1.3 植物病害标本的筛选及压制

　　采集到的病害标本需要进行筛选处理后进行压制,同一种病害,保留植物病害症状典型的标本,一部分用于标本的分离鉴定,一部分制作成干制标本。根据不同部位,决定不同的处理办法:(1)对一般的叶片和用于分离的标本可以采取直接干燥法,如对含水量较少的薄的叶片,在自然条件下容易卷曲(如小麦、臭椿等叶片),需要随采随压,其他的可以带到实验室内用标本夹进行压制,即将标本整理平整后,放置在2～3张干燥的吸水纸上,一般每层至少用3～5张吸水纸,在吸水纸的上、下方各放置一张瓦楞纸,以增加标本的透气性[5],含水量大的要适当多加几层,然后用标本夹夹紧,日晒任其干燥,在此期间,要经常更换吸水纸,根据具体情况,前三天每天需要换1～2次,以后每2～3天更换一次,直到标本彻底干燥为止。(2)对不用于分离的标本,为了保存标本的原色,可以采用陈尚义(2000)提出的烫干法、硅胶烘干法[6]及刘春元等(2003)提出的微波干燥保色法[7];也可以采用冷冻干燥法,即标本在冷冻的情况下干燥,几乎能完全保持原有的色泽和形状。(3)自然干燥:水分很少的标本如枝干病害的枝条等,不需要采取任何干燥的手段,在空气中自然干燥[8]。

　　3.1.4 塑封标本的制作及保存

　　塑封标本的制作受一定条件的限制,必须选择适合塑封的标本材料,如叶片标本和较小的茎秆(如小麦、水稻)等标本。在塑封之前,植物病害标本必须经过干燥和消毒,然后统一规格选择塑封胶片的规格及症状典型的病害标本,具体步骤如下:(1)标本选择:选择病症和病状典型、颜色好、表面干净无破损的植物病害标本,进行修剪和整形。为了能满足两个自然班上课,同一种病害都需要制作六份,所以要选择多一点的病害标本备用。(2)标本摆放:选择统一标准的塑封胶片,将一张稍小的白纸放入胶片中,然后将修剪好的标本合理摆放,便于观察病害的特征,又能放在胶片的合理位置,使做出的塑封标本美观、整洁即可。如果较小的标本,如小麦秆锈病、花生黑斑病等可以多放几个标本。(3)粘贴标签和二维码:在胶片的右下角放入标本的标签。标签要统一规格,包括病害的名称、拉丁学名、采集人等;在标签一侧,插入该病害的二维码,学生可以通过手机扫描一下,就可以知道病害的相关信息,如病害的症状、病原形态特征、病害的发生特点、发病规律及条件、相应的防治措施及参考资料等等,可直接将这些内容存到手机上,以备课后复习,而不用再去找书本,简单快捷。(4)过塑:按照塑封机的操作规程,将摆好标本的胶片放平,放入预热到160℃的过塑机中塑封即可。(5)塑封标本注意事项:①物病害标本必须完全干燥,否则标本塑封后易失绿;②温度要合适,这样塑封的标本平、清晰;③布局要合理,美观大方且病害症状典型清晰[9]。(6)塑封标本的保存:根据病害类型或受害作物不同,可以将塑封标本装订成册,放在干燥、阴凉的地方进行保存,切忌潮湿、强光和高温。

　　4 塑封标本在植物病理学实验中的应用

　　植物病害标本是植物病理学实验课不可或缺的重要教具,学生可以不受时间和空间上的局限,在实验室中通过对各种病害标本的观察,直观地感受到田间植物病害发生的症状特点,标本架起了理论教学与实践教学的桥梁。因此,植物病害标本数量的多少和质量的好坏直接影响到实践教学的效果[10]。作为培养植保人才必备的实验用材,实验课中标本的多样化更能提高学生认识病害的兴趣,如“普通植物病理学”“农业植物病理学”“基础植物病理学”等专业基础实验课中,每一堂课所用到的标本几乎涵盖标本库中所有形式的标本,如病原挂图、病害症状挂图、玻片标本、散装的腊叶标本、盒装标本、过塑标本等,每次实验课还提供2～5种新鲜标本供学生观察和制作成临时玻片,以便对病害加以识别和鉴定,这样更有利于学生理解和掌握鉴别要领[11]。随着多媒体互动系统的应用,虚拟玻片、录像、PPT等也是重要的授课手段,标本种类的多样化结合不同的教学手段,使得实验课程内容更加丰富多彩,学生可以通过不同标本形式和不同的多媒体课件,多方位得了解和掌握理论课中所讲的病害特征,其中在教学中利用手机等通讯设备,扫描添加二维码的过塑标本,如君迁子的角斑病、桃树的白粉病及细菌性穿孔病等,更能简单、形象、快捷地掌握各种病害的症状、病原、发病规律及综合防治措施等,调动学生的全部感觉器官,有利于学生识记[12],而不用再查阅课本,节省了时间;通过扫描也可以将与病害相关的知识存储到手机上,便于课后复习之用,提高了学习效率。但由于过塑标本的制作受特定条件限制,只能作为盒装标本的补充,增加标本的多样性,丰富标本的种类。

　　5 结语

　　植物病害标本是植物保护专业“植物病理学实验”课程重要的资源,在本科的实践教学和科研中有着重要的作用。病害标本的建设是一项切实提升教学质量的重要保证,也是一个长期积累的过程。随着大学生素质培养的需要及多媒体技术的发展,许多新的要求也随之而来,标本保存多样化和应用现代化逐渐成为未来发展的方向。根据实验课的要求及病害发病的部位不同,病害标本的制作方法也各不相同。同一种病害的不同部位,可以采用不同的病害标本制作和保存技术,如加上二维码的塑封标本,为学生提供了更方便的学习素材,使得病害标本更加多种多样,补充了标本库中标本的种类。目前,部分病害的塑封标本已制作完成,结合其他形式的标本和教学手段,以期为植物病理学的实验教学提供更丰富的教学资源,提高实践教学的效果。

　　参考文献

　　[1] 杨媚.植物病害标本的类型及其制作技术[J].安徽农业科学,2014,42 (8):2359-2360.

　　[2] 张美萍.植物塑封标本的制作[J].生物学杂志,1999,16(5):31.

　　[3] 杨媚.植物病害标本在教学改革中的地位和作用研究[J].安徽农业科学,2014,42( 5) :1583-1584.

　　[4] 崔继武,杨寒丽.植物病害标本的采集、制作和保存方法[J].河北农业,2014(1):36-37.

　　[5] 姜治国.植物塑封标本制作技术[J].湖北林业科学,2017,46(5):89-90.

　　[6] 陈尚义.植物标本保色新方法[J].教学仪器与实验,2000,12(1):15.

　　[7] 刘春元,刘建华.蜡叶病害标本微波炉干燥保色法[J].植物保护,2003,29(5):14.

　　[8] 杨广玲,董会,张卫光.植物病害标本的采集、制作与保存[J].现代农业科技,2010(11):188-189.

　　[9] 张德俭,靳学惠,马汇泉,等.植物病害标本塑封保存技术[J].现代化农业,1995(10):33-34.

　　[10] 刘旭燕,蔡红,陈兴全,等.植物病害教学标本的建设和管理[J].云南农业大学学报 (社会科学版) ,2017,11 (6):109-112.

　　[11] 许美容,邓晓玲.对普通植物病理学实践教学的思考[J].实验科学与技术,2015,13(3):85-88.