6%羟乙基淀粉130/0.4对骨折创伤兔子血清白蛋白、微血管白蛋白渗

摘要：目的：探讨6%羟乙基淀粉（HES）130/0.4对骨折创伤兔子血清白蛋白、微血管白蛋白渗漏、炎性因子的影响。方法：将20只健康雌性大白兔随机分为模型组和HES组，各10只，均采用钝器敲打后肢造成后肢骨折，行骨折切开内固定术。术后，模型组注射10 m L/kg生理盐水，HES组注射10 m L/kg 6%HES 130/0.4，连续3 d。比较两组血清白蛋白水平、微血管白蛋白渗漏情况以及白细胞介素-6（IL-6）、C反应蛋白（CRP）、降钙素原（PCT）水平。结果：术后72 h，两组血清白蛋白水平低于术前，但HES组高于模型组，差异有统计学意义（P<0.05）;HES组肠系膜微血管白蛋白渗漏率低于模型组，差异有统计学意义（P<0.05）；两组血清IL-6、CRP以及PCT水平高于术前，但HES组低于模型组，差异有统计学意义（P<0.05）。结论：骨折创伤兔子术后存在血清白蛋白水平下降、炎性因子水平升高情况，给予6%HES 130/0.4治疗可以减小血清白蛋白降低幅度，下调IL-6、CRP以及PCT水平，改善白蛋白渗漏情况。

关键词：6%羟乙基淀粉130/0.4;骨折;兔子;微血管白蛋白渗漏;

目前，由交通事故导致的骨科创伤事件发生率不断上升，患者大多创伤严重，需要接受手术治疗。有研究显示，患者术后常出现继发创伤性毛细血管渗漏，临床主要表现为毛细血管损伤，血管通透性增加，多数患者伴随低蛋白血症[1]。另有研究显示，低蛋白血症、创伤以及感染等均会导致微血管蛋白渗漏[2]。白蛋白是维持胶体渗透压、参与药物体内代谢的重要蛋白，目前临床中只能通过补充蛋白来缓解症状，因此在手术过程中给予适当干预，降低血管外渗漏风险具有重要意义。6%羟乙基淀粉(HES)130/0.4是相对分子量为130 000 Da的大分子物质，因其分子量集中，不会对肝、肾、凝血功能造成影响，目前已有研究证实其能够治疗成人毛细血管渗漏[3]。本研究选取兔子作为研究对象，构建骨折创伤模型，给予HES进行干预，分析其对骨折创伤兔子血清白蛋白、微血管白蛋渗漏、炎性因子的影响，现报告如下。

材料与方法

实验动物：SPF级雌性健康大白兔20只，月龄(3.1±0.5)个月，体重(2.5±0.5)kg，均采购自山东泰邦生物制品有限公司。

实验试剂和药物：异戊巴比妥钠(生产厂家：上海新亚药业有限公司；批准文号：国药准字H31020240),HES(生产厂家：上海源叶生物科技有限公司；货号：S24022)，异硫氰酸罗丹明(生产厂家：Sigma/Amresco公司；CAS编号：36877-69-7)；白细胞介素-6(IL-6)试剂盒(生产厂家：武汉赛培生物科技有限公司；批号：20226143),C反应蛋白(CRP)试剂盒(生产厂家：武汉赛培生物科技有限公司；批号：20223940)，降钙素原(PCT)试剂盒(生产厂家：武汉赛培生物科技有限公司；批号：202218672)。

实验仪器：光学显微镜(生产厂家：日本Olympus公司)，酶标仪(生产厂家：美国BD公司)。

方法：将20只健康雌性大白兔随机分为模型组和HES组，各10只。常规备皮、碘伏消毒，铺无菌巾，经耳缘静脉注射0.1 m L 5%异戊巴比妥钠进行麻醉后，采用钝器敲打后肢造成后肢骨折，行骨折切开内固定术，术中采用异戊巴比妥钠2～5 mg/(kg·h)静脉维持麻醉。于骨折部位外侧做一切口，显露股骨骨折部位，纵行切开骨膜，胯骨折线置入合适的国产四孔钢板，远近端各固定2枚螺钉，在骨折对应的肌肉组织2 cm×2 cm作为软组织缺损模型，缝合肌肉和皮肤。术后模型组注射生理盐水10 m L/kg,HES组注射6%HES 130/0.4 10 m L/kg,1次/d，连续输注3 d。

观察指标：(1)血清白蛋白水平：术前和术后72 h，取大白兔耳缘静脉血3 m L，采用低温恒定离心机以12 000 rpm离心10 min，取上清，采用改良的异硫氰酸罗丹明终点比色法检测血清白蛋白浓度。(2)微血管白蛋白渗漏情况：术后72 h，两组大白兔均腹腔注射3%戊巴比妥钠1 m L，麻醉后切开原手术切口，将兔子转移到激光共聚焦显微镜载物台上，提起一段约15 cm的小肠，肉眼观察肠系膜血管分布，选择细小血管走行、脂肪较少区域应用激光共聚焦显微镜进行观察，设置激光波长543 nm，调节镜头20倍。耳缘静脉注射5%的异硫氰酸罗丹明标记牛血清白蛋白1 m L，获取数字化图像，采用FV10-ASW 2.2 Viewer软件计算肠系膜微血管白蛋白渗漏率。(3)血清炎性因子：术前和术后72 h，取耳缘静脉血3 m L，采用低温恒定离心机以12 000 rpm离心10 min，取上清，采用酶联免疫吸附法测定IL-6、CRP、PCT水平。

统计学方法：数据应用SPSS 26.0统计学软件分析；计量资料以表示，采用t检验；P<0.05为差异有统计学意义。

结果

两组血清白蛋白水平比较：术前，两组血清白蛋白水平比较，差异无统计学意义(P>0.05)；术后72 h，两组血清白蛋白水平低于术前，但HES组高于模型组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 两组血清白蛋白水平比较

注：与本组术前比较，*P<0.05

两组肠系膜微血管白蛋白渗漏比较：术后72 h,HES组肠系膜微血管白蛋白渗漏率低于模型组，差异有统计学意义(t=6.287,P<0.05)。见图1。

图1 两组肠系膜微血管白蛋白渗漏比较

两组炎性因子水平比较：术前，两组血清IL-6、CRP以及PCT水平比较，差异无统计学意义(P>0.05)；术后72 h，两组血清IL-6、CRP以及PCT水平高于术前，但HES组低于模型组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 两组炎性因子水平比较

注：与本组术前比较，*P<0.05

讨论

围术期液体治疗是处理骨折手术患者的关键环节，主要目的是维持血浆胶体渗透压，从而维持内环境稳定。研究显示，低蛋白血症严重程度与患者术后并发症发生率、死亡率呈正相关[4]。有学者发现，手术危重患者血浆中白蛋白浓度<1 g/d L时，术后并发症发生率和病死率均较高[5]。还有学者发现，烧伤患者或者手术患者在创伤后数小时内白蛋白水平会明显降低，因此认为手术造成的创伤可能会引起微血管通透性发生变化，导致白蛋白渗漏，因此对于手术患者，应密切关注低蛋白血症的发生情况[6]。目前关于微血管白蛋白渗漏机制尚不清楚，多认为与中性粒细胞和血管内皮细胞激活，引起炎性反应，释放大量炎性因子，导致血管通透性增加有关。

目前，临床中减少微血管白蛋白渗漏的方法主要是加入高渗盐水、人工胶体及控制感染等，HES作为新型高分子淀粉材料，能够通过减轻炎性反应、提高血管渗透压、改善微循环，从而减少微血管渗漏[7]。本研究结果显示，术后72 h，两组血清白蛋白水平低于术前，但HES组高于模型组；HES组肠系膜微血管白蛋白渗漏率低于模型组；两组血清IL-6、CRP以及PCT水平高于术前，但HES组低于模型组。分析原因：(1)HES作为高分子材料，能起到一定的“封堵”作用，从而减少微血管渗漏；(2)微血管渗漏率和膜面积、流体静压等呈正相关，与蛋白反射呈负相关，HES能够升高血浆中的蛋白反射系数，从而达到减少微血管渗漏的目的[8];(3)HES能够抑制促炎介质释放，改善中性粒细胞和血管内皮细胞激活引起的组织损伤，降低血管通透性。

综上所述，骨折创伤兔子术后存在血清白蛋白水平下降、炎性因子水平升高情况，给予6%HES 130/0.4治疗可以减小血清白蛋白降低幅度，下调IL-6、CRP以及PCT水平，改善白蛋白渗漏情况。

参考文献

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[3]张倩,黄绍艳,王鲁甬,等.6%羟乙基淀粉130/0.4影响肝硬化患者蛋白渗漏的作用机制[J].山东第一医科大学(山东省医学科学院)学报,2021, 42(12):908-912.

[4]马敏慧，万晓红非感染患者术后低蛋白血症的发生机制及影响因素研究进展[J]医学综述,2017,23(13):2535-2539.

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